作者jodelle (希望......)
看板Biotech
标题Re: [求救] miRNA 的cloning
时间Wed Jul 22 23:48:24 2009
其实可以不用这样啦~~
可是试着在target RNA两段加以只序列的linker就好了阿
※ 引述《peggy814 ( )》之铭言：
: 最近准备要作miRNA的实验
: 老板是打算自己clone miRNA的 construct
: 看了paper之後
: 他们是clone pre-miRNA insert由PCR得到
: paper上使用的PCR primer是根据pre-miRNA的sequence
: 设计overlapping的primer
: forward和reverse的primer分别大概是60~80 mer
: 我找了几个paper里面所clone的miRNA
: 对了miRBase里面的sequence之後
: 只能看出forward和reverse primer大概有overlap十几二十个mer
: (不同的miRNA overlap程度不同)
: 想请问如果我要设计primer的话
: 是只要forward和reverse primer有overlap到就可以了吗?
: 还是有其他的需要注意?
: 谢谢^^
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