作者abbyyam (ㄟ逼)
看板Biotech
标题[求救] Transwell invasion 求救
时间Mon Jul 6 11:56:13 2009
想请问大家做invasion时的条件
我知道市面上有kit 是专门在做invasion的
很像已经铺好matrigel之类的东西
anyway我们实验室是自己铺matrigel
但是目前有几个问题
1.就是我该使用多少matrigel?
我是用24-well plate 来做的
目前的protocal 是加30ul的matrigel 凝胶O/N
但是总是觉得非常难铺平,因为张力问题中间会凹下去
所以才想问说该加多少的量?
虽然即使凹下去但是离membrane还是有非常非常些微的距离啦
2.Matrigel与medium的比例?
我目前是用 matrigel:growth medium = 1:3
但是目前遇到的问题是
在实验当天在外槽加入medium,使insert的membrane回水并适应medium时
(我是用30min~3hr)
会发现外槽的medium很像会渗入insert中
使得我的insert中内容物上升 (matrigel不知道是跑哪了= =" 应该是还在里面吧)
所以不知道我外槽的medium会不会跟内槽的matrigel溶在一起了
以上两个问题让我对我的实验结果有些怀疑
他们到底有没有在invasion呢??
有在做的人麻烦解答了> <
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