作者feelpink (败犬)
看板Biotech
标题Re: [求救] 关於磷酸化的蛋白质
时间Mon Jun 1 23:08:57 2009
※ 引述《monkey9841 (cc)》之铭言：
: 之前有听说
: 例如压p-ERK完的膜 经blocking後及hi ERK的一抗二抗 还可以压出ERK(total protein)
: 不知这方法是否可行
: 作法是要如何做呢
: 感觉这方法似乎比较偷吃步 不过可以少跑几片胶阿!!
: 还是说p-ERK跟 ERK 还是要分别跑胶呢
stripping之後先用2d H2O wash
再用TBS/T wash
blocking可用百分比较低的牛奶
hi完一抗二抗就压得出来了
stripping buffer可以买commercial也可以自己配
有时候效果不好可以稍微加热（约摄氏50度左右）
会stripping得比较乾净
其实很多都可以稍作调整
给你参考看看:)
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