老师希望我把某种酵母菌的某个基因一个踢除 另一个置於一个调控式的promoter的下游 藉由抑制此promoter去看此基因扮演的脚色 有看到预期的型态改变 也做了Southern确定基因确实被改成我们所想的那样 现在老师希望看mRNA是否真的有下降 就希望我做RT-PCR确定 因为抑制此promoter大约只能抑制80%的表现 还会有大约20%的表现 结果做了RT-PCR发现没有什麽差别 cycle数也试过很多种不同的 都看不太到希望的差异出现 有想过会不会是差异被PCR放大所以看不到 再来因为我基因全长是1500bp 也有现有的primer 所以就用此primer去夹 不知道假如我缩短夹出的片段 会有意义吗 夹个大约500左右 有没有可能会有差异出现??? (因为乱想想说会不会片段比较长 比较不好夹 让差异减少了@@) 因为实验室都没人做过关於RNA方面的实验 所以我是乱想的 不知道还有没有其他地方可以调整 藉此用RT-PCR看出差异 不然我又要去摸索怎麽做real-time或是Northern了 感谢耐心看完的大大 也希望有大大可以给我一些意见 因为离毕业没多少时间了 拜托了~非常感谢^^ --

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