作者chelsy522 (chelsy)
看板Biotech
标题Re: [求救] micronucleus test
时间Wed Apr 22 11:19:23 2009
可是我主要是要看经由treat产生的binuclear cells 有多少cell会有micronucleus
所以我想taxol的方法好像不适合拿来用... (希望没说错)
因为PHA会使血球细胞aggregate 所以treatment的部分我也有些疑惑
protocol上写treat44小时後再加cyt-b 需要remove PHA再加cyt-b还是可以直接加?
(可是在culture一两天就可以看见明显的沉淀 也不知道那里面是活的还死的细胞)
老师是说看要不要treat 2个小时後remove PHA 可是也不知道这样会不会没效...
想问问也有用血球细胞加入PHA和cyt-b treatment的高手们
能不能给点建议or你们的作法 (ex:compound的厂牌和浓度 treat时间和cell density)
因为我目前是follow那篇paper的protocol 可是做不太出来Orz
p.s大家养PMN或MNC(用圆底的culture tube) 是直接静置还是会让它shake or 转转转
另外也想问问做临床的版友们 病人的血清你们是采用过滤灭菌还是照UV而已
如果是用过滤灭菌 是选用多少孔径的filter呢? 谢谢~
※ 引述《oplz (Go Patriots! Go Brady!)》之铭言:
: 如果你的目的是要造成 micronuclei..
: cyto-B 并不是一个好方法 blocking contractile ring 只会给你 binuclear cells
: 最有效的方法是-
: 1. taxol to arrest cells in mitosis
: 2. RO-3306 to force anaphase entry
: 3. washout RO-3306 and taxol after 90 min
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