※ 引述《sjacky (陈小文)》之铭言： : 工作关系，开始接触Western : 刚开始学习，目前还算顺利 : 其中遇到一个问题 : SDS-PAGE->Transfer->1st Antibody->2nd Antibody->压片 : 目前完整流程大概做了9次左右 : 其中有两次，压片後，连Marker都无法显示出来 : 我使用两种Marker，一种是在SDS-PAGE上可显示的，另一种是压片时可在底片上显示 : 其中一次，是我在压片时，第一次有压出来，第二次时底片不小心跟Mambrane接触到 此时最好是把膜再拿去wash几次 (不然底片上的化学物质不知道是否会沾上) 如果怕在加入substrate之後 讯号不够强 可以再一次与anti-xxx-HRP (二抗) 反应一次 好吧 说我的悲惨经验是santa cruz的substrate 因为虽然说明书上说 他的反应削弱时间很长(当然大家都这样说自己家的产品) 但是 我用过之後 明白了 除非我的手动作非常快 再加上我的样本可能压片几分钟就搞定 不需要再重压各几百次 或是 我的讯号本身超级强大的状态下 圣诞老公公都可以搞定 後来 我还是换回去MP的产品(在我很炉的自己管帐之後).......... ----- 其实圣诞牌 是我毕业後换到另一实验室 而实验室管理的学姊 直接问杂货店业务(一人业务加老板) 对方就直接卖他一堆 抗体(圣诞牌) 和比较便宜的PVDF 再加上ECL 我想很多人都一样 会想很方便的 反正问sales 就好 作啥在去看 哪家的比较好 (至少在医院很多是这样 而且做实验的搞不好跟买药品的是不同人) 但是实际上 虽然你省了钱 省了时间 但却花费了你的样本 你的实验过程 然後得到一堆 你不知道是哪里发生问题的结果 (当然研究生就更惨烈) 再买东西的时候 我情愿多花一点经费 花点时间找Paper 至少我觉得 作实验得到结果时 开心会大於伤心 --

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