作者LIAR (堕天使)
看板Biotech
标题[闲聊] 各种程度的低温，对sample保存的有何差异？
时间Sun Apr 12 23:43:27 2009
我目前只知道低温对protein的degradation有很好的抑制效果，但也听过结冰是另一种
造成denature的原因，因为冰晶有氢键的问题。
不过也有人说冰晶是在缓慢冷却却过程中才会产生的，如果直接丢液态氮就可以避免。
我想请教的问题有两个：
1.像是enzyme或是antibody这种要二三四级结构的protein，丢液态氮的保存，
和加抗冻剂放-20度或-80度，哪种会比较适合？
2.像是要跑SDS-PAGE这种最後一定会denature的，是否就不用考虑氢键问题？
也就是说cell lysis後，不管有没有离心或加入sample buffer，就算来回解冻也
无所谓？只要越低温越好？
--
太初有道，道与耶和华同在，道就是耶和华。这道太初与耶和华同在。
万物乃藉祂所造，凡被造的没有一样不是藉着祂所造的。生命在祂里头，
这生命就是人的光。光照在黑暗里，黑暗却不接受光。
吾辈乃生於黑暗，行於黑暗。因神之指引，行向光明；又因撒旦诱惑，回归黑暗。
我不断地徘徊於光明与黑暗之间，从被造之日至今，又自今直到那审判之日的来临。
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 123.192.22.47
1F：推 sGoat:1.蛋白放-80还是会有保存期限的问题,抗体通常放-20不需液态 04/13 10:34
2F：→ sGoat:氮预先处理,(指在cocktail情形下) 2.蛋白重复解冻会造成band 04/13 10:36
3F：→ sGoat:模糊不够sharp...最好是分批保存,一次用一批 04/13 10:37
4F：→ sGoat:放长期情形下也是-80优於-20度保存... 04/13 10:38
5F：推 REIDO:请问为什麽重复解冻会模糊呢？ 04/13 13:43
6F：推 sGoat:我自己有跑出这种结果,推测可能是造成degrade... 04/13 14:53
7F：推 bluecsky:如果是跑PAGE的 为什麽不直接加sample buffer就好?? 04/14 08:54
8F：→ bluecsky:不管什麽protein 保存中都会慢慢的degrade 04/14 08:55
9F：→ LIAR:那如果是要有二级以上结构的保存呢？直接丢液态氮比较好吗？ 04/27 22:47