作者lazyQ (认真过每一天)
看板Biotech
标题[求救] 怎麽得知细胞有无表现我要的蛋白质?
时间Fri Apr 10 22:34:35 2009
我的实验是要transfection一个plasmid，表现出我要的蛋白质
但是这个蛋白是会自己从细胞
secret出来。
transfection的操作没有问题，我的ctr:带有萤光基因的plasmid
有正常的表现，可是我要怎麽知道我的蛋白也一样成功的被细胞
表现？
抽RNA跑RT-PCR吗？ 或直接做western blot？
如果是做western blot，我需要lysis细胞淬取蛋白，还是直接从
medium中取得我的蛋白？ 需要注意到的细节？
谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 61.231.194.88
※ 编辑: lazyQ 来自: 61.231.194.88 (04/10 22:36)
1F：推 vancent:SECRETION FORM PROTEIN直接买kit收medium过column即可 04/10 23:22
2F：→ vancent:需要注意的细节:金钱 04/10 23:22
3F：推 tsubasawolfy:楼上中肯= = 04/10 23:26
4F：推 hchs890843:序列有LL的leading sequence理论会跑出来 04/10 23:29
5F：→ hchs890843:但是我老师会要我收medium与cell lysate一起跑WB 04/10 23:29
6F：推 turtle24:medium要浓缩或冷冻乾燥 不然产量太低可能会误判 04/11 00:20
7F：→ sisyphus:用路西法assay作? 04/11 13:18