※ 引述《reteporeh (被实验中)》之铭言： : 目前要进行EMSA的实验因为之前没做过 : 邻近的实验室也没有相关的实验技术可以询问 : 所以只好来这请问各位前辈 : 1. 去做protein-DNA interaction 的DNA probe的序列长度有限制吗？或者有最佳长度? 20-40 bp 最佳25-30 : 2. 我看protocol 有加poly dI dC 也有加cold unlabel probe 想请问这两个都是 : 来当竞争子吗？所以可以只加两者其一或者是两个都要加？ : 恳请有经验的前辈可以回答一下,感激不尽 <(_ _)>... poly dI dC: 去掉non-specific protein 因为核内有许多DNA binding protein 所以要加入non-specific oligo防止non-specifc protein黏到target protein上 cold unlabel probe: 做competition 假设protein跟lable protein会specific-binding并产生signal 再加入unlabel probe後 signal强度没变 则代表这个signal是non-specific binding 因为加入unlabel probe後会跟label probe去竞争target protein 於是让signal减弱或不见的情形 所以这样才可以代表这个signal是specific binding. -- 修奇︰当我的後宫吧。 伊露莉︰好，我知道。 修奇︰你应该问我为什麽要你当我後宫吧？ 伊露莉面带像是抱歉的表情看我，然後努力装出好奇的表情，说道︰ "是，修奇。你为何要我当你後宫呢?" hatako:因为我想和精灵达到协调，阿~可是我不会忘记你的，杰米妮。 --

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