作者lenti (啄木鸟)
看板Biotech
标题Re: [求救] pET29纯化
时间Tue Mar 3 19:46:31 2009
你的设计看起来没有问题, 而且你都说确定protein有表现出来了.
倒是你提到的inclusion body的问题, 你没有太多敍述.
你是用denature的方式去纯化呢?或者不管inclusion body 只收native的蛋白去纯化.
如果你只收native form protein 化去纯化, 也许量太少.
可能需要考虑denature的纯化方式.
※ 引述《bbiioo (梅子)》之铭言:
: 目前已把目标基因(1.5kb)接到pET29载体上
: 也已经表现出来 形成 inclusing body
: 目前想说先把蛋白纯化出来 打小白鼠作抗体
: 蛋白有确定有表现
: 但就是纯化不出来 我用的是 talon resin 进行纯化
: 基因架接的方式..有点难叙述 用图档呈现罗
: http://photo.xuite.net/bio.f21/3108685
: 我都有把我目标基因的stop codon给去掉
: 不知道这样的设计有哪边可能出问题?
: 麻烦大家帮帮忙了
: 谢谢
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