作者plokij5668 (落花满天蔽月光)
看板Biotech
标题[求救] PCR结果一直是smear的状态？！
时间Wed Feb 25 15:48:45 2009
目前在做PCR
之前做不同的时间点都做的出来
现在重P～跑出来的结果
有的时间点有band
但大部份却都看不出来有 band
都糊糊的一片
是因为reaction buffer里面离子浓度的问题吗
我的annealing 温度是67 度
extention 的时间是1 min （片段约1.2kb）
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 123.240.155.105
1F：推 sGoat:可能是template没有保存好,跑片胶看看有没有smear 02/25 15:57
2F：→ sGoat:不然就是缩短染色与退染时间... 02/25 15:58
3F：→ plokij5668:template 有试过～是没有问题的～我会试试缩短染胶的 02/25 16:12
4F：→ plokij5668:的时间～感恩阿！ 02/25 16:13
5F：推 oxoox:我有遇过这样的情况 结果是mg的浓度不对 稍微调一下就好了 02/25 21:51
6F：推 Menuet:你有没有查过你的primer适合哪种温度呀? 02/25 21:55
7F：推 kane0419:Mg的浓度大概多少到多少比较好？ 02/25 21:58
8F：推 porker:可以试试降低Mg浓度或用hot-start 的Taq做看看 02/25 22:59
9F：推 ookubo:请问一下重p的时候，template是用原本的还是用PCR product? 02/26 06:52
10F：推 yalinn:buffer或是dNTP坏掉 之前也是这样的结果 02/27 18:09