我第一个想法就是你的样本有问题 因为别人做其他样本 OK 你做其他样本也 OK 你做这个样本就会这样 很可能就是样本问题 更大胆一点推测 我觉得也可能是你 sample 纯化过程中使你的 traget protein 产生了团块／颗粒 而且你看那张 SDS PAGE 照片上其实也是有这种下雨痕 只是没有那麽明显 要记得, WB 的灵敏度远高於 coomassie blue 直接染 很多东西本来就是 coomassie blue 还看不 WB 就可以染出来了 要确认问题来源可以做以下实验： 用一个你认为不会有 traget protein 的样本来跑(但是还是经过同样的纯化步骤） 看是不是还有那些点 拿一支无关的抗体（或是 houskeeping gene 的抗体）来跑你的 sample 另外你说高分子量区域染到的 band 为什麽 SDS PAGE 上没看到 也是一样的原因 就是 coomassie blue 还染不出来 抗体却已经侦测到了 除了是不专一的辨识以外， 也可能是target protein 的 dimer trimer tetramer polymer.... -- 莫非定律: 到了期末才会想起期初曾选了一门课却一直没去上 补充定律: 拿到成绩单才发现上了一学期的课忘了去考期末考 -- ※ Origin: 生命科学 BBS <bbs.life.nthu.edu.tw> ◆ From: nomad202-174.d.umn.edu