作者a001ou (肉虫)
看板Biotech
标题Re: [方法] ROS 的测定方法
时间Sat Feb 7 05:59:41 2009
※ 引述《anti0822 (anti0822)》之铭言：
: 纳在请问一下~我想测加药後~是否可以增加ROS的量~那我是先染DYE~在加药吗~还是先加要再染DYE
: 麻烦了!
端看你的药物作用是多久而定
一般来说这些测ROS的染剂我染最久都不超过1小时
原因有三
一是这些染剂基本上都容易被氧化而形成萤光产物
因此当染太久的时候会大幅提高背景值进而导致药物处理的变化被稀释
二是这些染剂对细胞的影响不可预期
为了减少多余的不确定因素来影响实验的结果
因此不建议染太久
最後是一般来说ROS在细胞内的半衰期都很短
且大部分造成ROS上升的反应都是立即且快速的
所以染太久意义应该不大
但不可否认的会看到有些染12甚至是24小时的paper
这通常是观察药物影响抗氧化酵素诸如CAT or SOD等表现或是活性
进而是否会造成细胞内ROS level的改变
因此一切还是取决於您自己的实验设计与操作
最後祝你实验顺利
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