作者sharkcell (我好想念你,Chic)
看板Biotech
标题Re: [求救] TRIZOL 抽 Plant Total RNA 量太低
时间Thu Jan 29 04:21:46 2009
: 1. 秤重 0.1 g (顶多增加到 1.5 g). 放入Tube中. 再放入液态氮中
: 2. 自液态氮中取出 Tube,磨碎後先加300 μl TRIZOL vortex,
: 再加700 μl TRIZOL
: # 我也用过研钵磨成粉後,把粉末取出来秤重,再加TRIZOL,
: 但浓度还是一样低,不知道是不是动作不够快
我以前抽过马铃薯叶片的RNA(total RNA)
做法大至跟你差不多
我事先将叶片摘下後後入研磨杯中
然後加入液态氮磨碎
取大约100mg到eppendorf中
再加入1mL TRISOL混合均匀
剩下的作法跟你差不多
浓度也够作real-time RT-PCR
至於cDNA我就不清楚了
也许您过程中有点污染
或是sample基因的表现量本来就不高
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