作者turtle24 (乡民龟)
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标题[求救] 蛋白质纯化-产物退冰会沉淀
时间Wed Dec 31 12:24:11 2008
使用Ni2+ column纯化了数批蛋白质 表现系统是BL21以及BLR
elute->浓缩->通G25或透析换成PBS buffer->再浓缩->产物
产物冰存-70之後再退冰会大量雪花般片状沉淀 且难以回溶
操作同系统的约有四五人 每个人做的都会发生退冰沉淀的情形
resin中间有换过一次牌子 两个牌子的纯化产物都有退冰沉淀情形
请问有没有方法可以避免上述的沉淀
之後产物还需要二次纯化以及通S200分离杂band 所以尽量以不影响後续处理优先
初步的想法是从存放的buffer-PBS下手 提高盐类浓度或是添加一些物质
感谢解答及提供任何意见
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◆ From: 163.15.178.15
1F：推 chiehgriffin:protein浓度提高, 产生沉淀了 提高[NaCl] 12/31 17:44
2F：推 liuse:稀释浓度 01/01 13:39
3F：推 littleable:加点detergent看看有没有效,Triton X-100 01/03 00:42