作者crement (cometoseeme)
看板Biotech
标题Re: [求救] 不同PCR machine出现明显不同亮度的band
时间Mon Dec 15 20:47:41 2008
根据我用过上五百组以上的primer,跟实验室每年设计超过两千条primer的经验,
可以回答你老板......
『孩子,这就是人生。』
开玩笑的,
不过事实上真的是这样,
没有什麽叫做好或不好的PCR machine,
只有P不P出出来的机器。
PCR跟DNA sequcence,primer set,taq还有condition有关。
同样的condition,在壹台机器上可以,不代表其他台可以。
实验室以前都买9700,只剩壹台不是9700,但有gradient的功能,
很多PCR condition都是在gradient这台机器上作出来的,
有一阵子坏了,老板想说乾脆就换成9700,
实验室所有人都反对,因为一换的话,
代表超过3-5%的primer set要重新设计。
事实上ABI 9700不是比较好或是比较差,
这台机器贵在他是『认证过』。
就是说,实验室作出来PCR的condition,尤其是检验实验室,
是需要在这台机器上的状况能成功。
※ 引述《mimosasky (浪者天涯)》之铭言:
: 今天老板要我们测试两款PCR machine效能
: 用了EBV而anneal温度皆为55度c
: 除了机器不同外
: PCR条件都一样
: 分别在ABI9700与veriti测试
: 结果在9700出来的band明显较veriti亮
: 老板就我们啦...
: 不是veriti效能较好吗?
: 那麽结果为什麽会呈现相反?
: 我们测试过两台的ramp rate
: 都是在1.98度c左右~不会差太大
: 会是什麽样的因素影响如此结果呢?
: EBV的size较短约213bp~
: 拜托各位救火!
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过去的来不及追忆 现在的赶不及接受
得到的不懂得珍惜 失去的无法能忘记
这就是生活吗?!
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