作者nidus (咕叽)
看板Biotech
标题[求救] cloning的问题
时间Mon Dec 8 00:22:16 2008
实验流程大略如下:
ligation以及图菌後
隔天长出colony
挑单一colony做cloning PCR
检测是否目标基因有接进vector中
而我遇到的情况是cloning PCR检测有看到目标基因被放大
而我将该菌珠培养O/N後 隔天抽plasmid
再做enzyme digestion 结果却切不出那段基因出来
而且plasmid的位子好像在空的vector位子
送定序出来的结果也很诡异
ps我利用vector上的CMV30为primer 定序结果不到没有我塞进去的gene
序列也跟vector不同
请问有人遇到跟我类似的状况吗??
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◆ From: 125.225.135.239
1F:推 htjsu:有一种很小的机率是 你挑colony时沾到了没进去的plasmid 12/08 14:30