※ 引述《ricky31 (榤)》之铭言： : 之前萃取蛋白是加入PBS刮下来的 : 可是老师觉得 : 用trypsin打下来会比较好 : 测出来的浓度 : 的确 : 比用加入PBS刮下来的浓度高太多 : 但是 : trypsin本身就是一种蛋白 : 这样子的作法 : 不会影响细胞蛋白吗? : 老师觉得不会 : 但是 : 因为跟先前用PBS刮下来测出的浓度差太多了 : (用PBS的作法,浓度大约在200~300ug/ml，用trypsin的作法,浓度在800~1400ug/ml) : 所以我还是很怀疑用trypsin萃蛋白的作法>"< : 有人可以帮我解答吗? : 谢谢大家~ 使用trypsin可用来增加收取的细胞数，而不是用来萃取蛋白。 将细胞收下来之後，可低速离心去除含有trypsin的上清液， 再加入RIPA buffer将细胞lysis，高速离心取得含有蛋白的上清液去测定浓度。 (其实，我也不甚了解您的实验，所以不确定上述方法是否适合您使用) 一般常用RIPA buffer来lysis cell进而萃取蛋白。 不晓得您为什麽会使用PBS来萃取? 您萃取出的蛋白质浓度看来有点稀，可能是因为萃取方法不太适当。 您考量的trypsin会影响蛋白浓度测定，理论上是会影响的， 要实际证明，直接把trypsin拿去测蛋白质浓度就可知道。 BTW，有很多工具书和网路资料可查到萃取蛋白的方法，不妨参考一下。 还有版上的菁华区也有很多宝藏~ --

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