作者oypicard (Just do it!)
看板Biotech
标题Re: [求救] 分离小鼠脾脏Macrophage
时间Wed Nov 12 02:16:16 2008
※ 引述《onlyone0419 (期待)》之铭言：
: 请问有大大做过分离spleen macrophage的实验吗?
: 我是将spleen磨碎後
: 先用RBC lysis buffer将红血球打破
: wash 3次後用贴复的方式培养(RPMI-1640)
: 可是他就是不给我贴= =，不像腹腔Macrophage那麽会贴...
: 我1、2、4小时都有镜检，都几乎没贴
: 後来放整晚也不贴...
: 实在是伤脑筋@..@
: 希望有经验的大师们能倾囊相授<(_ _)>
我之前有做过类似的实验,
纯化的是CD11c+的细胞。
我的方法是先用histopaqe分层细胞,
histopaqe处理之後,
约有20-30% CD11c+的细胞,
而CD11b+也约为20-30%(不确定)。
再用MACS纯化CD11c+的细胞,
或者是用flow sorting。
不过splenic macrophage用贴壁的方法,
我印象中好像没有看过有人这麽做,
当然也有可能是我看得paper不够多,
以上希望对你有些帮助,
有错也请指正。
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我达达的马蹄是美丽的错误
我不是归人，我是马......
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◆ From: 218.32.128.15
※ 编辑: oypicard 来自: 218.32.128.15 (11/12 02:22)