作者cdkcyclin (在这里)
看板Biotech
标题[求救] 请帮我看一下Western的图
时间Sun Nov 9 17:34:31 2008
http://cdkcyclin.pixnet.net/album/photo/103949719
这是我的Wetsern图
我想要看的protein是HIF-1 alpha(120kD)
所使用的SDS page是10%
transfer 3hr,75V,4度
1Ab,1:1000,O/N,4度
2Ab,1:5000,2hr,室温
我这次的定量有点不准
但是我比较苦恼的是HIF-1的band看起来不太均匀
尤其是最右边的sample 深浅不一的很严重
请问可能是哪里有问题呢?
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 118.160.31.74
※ 编辑: cdkcyclin 来自: 118.160.31.74 (11/09 17:35)
1F：推 Nikio:恩 好怪～你controls 看起来没这些问题耶 @@ 11/09 23:43
2F：推 sGoat:请问是wet还是semi-dry transfer?最右边的lane有点拖尾 11/10 00:22
3F：→ cdkcyclin:是wet 11/10 12:25
4F：推 sGoat:有可能是PAGE时出的问题,造成sample拖尾 11/10 16:45
5F：→ sGoat:解决办法是sample loading时把上清部份混匀一下再加进去 11/10 16:46
6F：→ sGoat:还有跑胶时避开最左右的lane,尽量用中间的比较不会有问题 11/10 16:48
7F：→ cdkcyclin:谢谢你的意见 我会参考 11/12 22:15