作者pelagic (忙阿~~~~~~)
看板Biotech
标题Re: [求救] HSP90 acetylation??
时间Sat Nov 8 14:32:57 2008
※ 引述《cytospin (美国闯荡中)》之铭言:
目前对於HDAC inhibitor并没有很直接的证据
证明它具有特异性
所以是否在不同的细胞中会有所差异 目前并不得而知
但是在一些PAPER中 如Clin Cancer Res. 2007 Aug 15;13(16):4882-90.
中提到 它使用的浓度是nM 时间点不超过八个小时 它可以看到HSP90 有acetylation
当然不同的inhibitor是否会有不同的结果 还不清楚
希望这对原PO有帮助!!
: ※ 引述《cytospin (美国闯荡中)》之铭言:
: : 事情是这样开始的
: : 原本我在做HSP90 後来开始做HDAC inhibitor
: : 看paper说 HDACinhibitor不只会导致H3, H4,tubulin acetylation
: : 其他target包含了 STAT3, and HSP90
: : 所以我就做了这相关的实验
: : 可是我怎麽treat细胞 with HDACinhibitor
: : HSP90 and sTAT3都没有acetylation.... (我用direct and IP western测过)
: : 用的抗体是cell signalign的 anti-Act=lysine
: : 请问一下有谁有经验的吗??
: : 给小妹一点指点
: 在写清楚一点
: 同样的时间点和condition Act-H3, H4 and tubulin都很强
: HSP90 acetylation and state3 我都是用同个时间点 也就是24 hours
: 浓度是0.5 and 1 uM 也看到disassociation of HSP90 Vs client protein
: 就卡在甚麽都做不出来 HSP90 有acetylation...
: direct western的时候我total protein放了100 ug
: IP的时候我用2x10^7 cell做的
: 请赐教
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