作者cytospin (美国闯荡中)
看板Biotech
标题Re: [求救] HSP90 acetylation??
时间Thu Nov 6 22:22:04 2008
※ 引述《cytospin (美国闯荡中)》之铭言：
: 事情是这样开始的
: 原本我在做HSP90 後来开始做HDAC inhibitor
: 看paper说 HDACinhibitor不只会导致H3, H4,tubulin acetylation
: 其他target包含了 STAT3, and HSP90
: 所以我就做了这相关的实验
: 可是我怎麽treat细胞 with HDACinhibitor
: HSP90 and sTAT3都没有acetylation.... (我用direct and IP western测过)
: 用的抗体是cell signalign的 anti-Act=lysine
: 请问一下有谁有经验的吗??
: 给小妹一点指点
在写清楚一点
同样的时间点和condition Act-H3, H4 and tubulin都很强
HSP90 acetylation and state3 我都是用同个时间点 也就是24 hours
浓度是0.5 and 1 uM 也看到disassociation of HSP90 Vs client protein
就卡在甚麽都做不出来 HSP90 有acetylation...
direct western的时候我total protein放了100 ug
IP的时候我用2x10^7 cell做的
请赐教
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