作者suglaz (小微)
看板Biotech
标题[求救] OCT会不会让组织发萤光??
时间Tue Nov 4 11:09:12 2008
现在正在做老鼠组织的冷冻切片~
结果发现切之後,什麽都还没处理(一抗.二抗都没加)
在显微镜下就可以看到萤光,绿光.红光.UV都可以看到,其中以绿光最亮
所以现在导致我染上去的都被背景的绿光盖过~
以下是我的步骤
1.组织取下
2.泡4%PA overnight
3.PBS WASH 3次
4.换20％ surcose 浸泡至要切的时候
5.OCT包埋
6.切片10~12um
直接看就有萤光了!
由於做细胞染色时,我也会用4%PA固定,并没有出现萤光的问题~
surcose的做法~大家也都有在用,发萤光的可能性不高~
所以目前怀疑是OCT的问题~
想请问版上的各位,有没有人有同样的问题~
我们家用的OCT是樱花牌的~
有推荐其他使用起来没问题的吗?
或者是其他方法~
谢谢!!
sorry~更正OCT~
我切的是心脏~~不过我也有切肾脏~两个都会发萤光
心脏是有自发萤光的说法拉~可是肾脏总不会也有吧~!!
唉~还是其实我养是萤光鼠~(爆)
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◆ From: 140.128.153.200
1F：推 sGoat:自发性萤光? 11/04 11:18
2F：推 HIbaby:肝脏切片有时後会出现自发性萤光 11/04 12:20
3F：推 oopa:原PO说的是OCT吗? 11/04 13:05
4F：推 formoxa:应该是说OCT吧，我的切片不会耶 11/04 18:23
5F：→ formoxa:但是我不是肝脏 11/04 18:23
※ 编辑: suglaz 来自: 140.128.153.200 (11/05 09:18)
6F：→ suglaz:楼上是用哪个牌子呢~?切哪个部位阿~? 11/05 09:20
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7F：推 DouglasT:有很多器官组织会发生autofluorescence 11/06 03:41
8F：→ DouglasT:hepatocyte, lung epithelium, brain microvessels 11/06 03:41
9F：→ DouglasT:如果观察重点放在炎症反应区，那就更令人头痛了 11/06 03:42