作者leoblack (朋友看太重的猫)
看板Biotech
标题[闲聊] datasheet的information能信嘛?!
时间Fri Oct 31 02:53:48 2008
如题
虽然说"不信datasheet, 你还要信啥?"
或是"反正照datasheet做不出来~可以要厂商赔钱啊"~等等
但我还是想来问一下~^^"
就是啊~
最近买了一个要认磷酸化蛋白质的抗体
以往所学到的概念是~由於milk中含有大量的tyrosine~所以会干扰磷酸化的结果~
因此~做磷酸化的western时~最好是用BSA来做blocking~
但我买的那只抗体datasheet居然说"用5% skim milk" blocking
这令我很傻眼~囧~
虽然试了不行~可以跟厂商argue要他们赔钱~
但sample取得不易~实在没那个勇气给他try下去~^^"
以前自己没做过多少次看磷酸化蛋白的WB~所以上来请教一下其他大大们~
真的有"即使用skim milk blocking,也做得出来的磷酸化WB"嘛!?^^"
感谢~
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 61.62.72.30
1F：推 blence:我用过近十支不同的磷酸化抗体都用milk做的,也都是很顺利 10/31 03:06
2F：→ blence:不过我的确不信datasheet的,WB都一致流程,完全不照各家步骤 10/31 03:09
3F：推 tsubasawolfy:可以 有些公司的p-Ab可以用牛奶 10/31 07:30
4F：→ tsubasawolfy:cell signaling的pATM pChk1 pChk2都用milk压的出来 10/31 07:31
5F：→ tsubasawolfy:但是他的pRb却要用BSA XD 10/31 07:32
6F：推 tsubasawolfy:不过如果你是要单独针对p-tyrosine,p-serine,p-threo 10/31 07:34
7F：→ tsubasawolfy:nine的话 你说的就没错了- -a 10/31 07:35
8F：→ leoblack:好的~感谢楼上两位大大~那我姑且信一下datasheet好了^^" 10/31 19:34
9F：推 Seal13:最好的办法 还是自己试做 因为没有绝对的方式 11/01 09:19
10F：→ Seal13:通常datasheet就当作参考用 11/01 09:20
11F：→ paua:我用5% milk in TBST, cell signaling的phospho Ab, 11/02 17:25
12F：→ paua:band很明显, 没有背景讯号. 11/02 17:26