作者yohko86 (光辰星)
看板Biotech
标题[求救] transfection的疑问
时间Sun Oct 26 20:20:01 2008
材料+步骤:
目标DNA 16 ug
VSVG 4 ug
gag-pol 12 ug
GFP 1.87 ug
CaCl2 100 ul
加入auto ddH2O到1000ul
将所有的东西混合 再加入2X BBS 1000ul 反应约10分钟
加到约长8分满的293T细胞(有8ml medium)中
问题:
1.想请教各位大大们 使用retrovirus做transfection
cell是不是一定会出现萎缩或死亡的现象呢? 萎缩是不是代表cell死掉了?
2.做了四次感觉很能难稳定cell状况 有一次control的cell状况良好且能看到萤光
可是实验组的cell就萎缩和死亡 不然就是发生cell死亡+污染
不知道用电的方式效率会不会比较高且稳定?
3.我的目标是要用retrovirus去infect U2OS cell
这样还适合用电的方式做transfection吗?
新手上路请大大们多多指教 有很多还不是很懂 不对或缺漏的地方请告知小弟
一定马上改进 谢谢大大~
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 218.173.170.208
1F：推 aceliang:retro是用293T??我也是新手哈 10/26 20:33
※ 编辑: yohko86 来自: 218.173.170.208 (10/26 20:40)
2F：→ yohko86:谢谢楼上大大提醒错字^^" 10/26 20:41