※ 引述《allergy1115 (白天彼此明争暗斗)》之铭言： : 请问版上有人是正在养RAW cells, 并且刚好也在上FLOW的吗 : 有些技术性问题想请教 : 我自己遇到的情况是 : RAW cells 会分裂(废话, 自己骂自己), 所以在我的FSC/SSC 会出现明显两群细胞 : 我要染的marker, 好死不死, 只有在大size 那群细胞会表现, 没有养过RAW cells, 不过这群小size细胞会不会是死细胞? 可以试试看过个将死细胞去掉。 因为cell line会分因为分裂变成两群, 感觉还蛮奇怪的, 说不定是在将细胞打下来的过程中死掉了, 还是说你有做过一些serum starvation之类的处理。 : 刚分裂出来小size细胞似乎不太表现我要的marker.. : 这让我很困扰, 因为整个population 是一样的RAW cells,确有一部份表现一部份不表现 : 这样要怎麽去量化我的marker表现?? : 此外的另一个问题是, 大size 的细胞, 似乎有一部份超过了FCS/SSC1000的边线 : 请问我要怎麽把数值压下来?? : 目前适用liner, 改用log/log 吗??或是有人可以分享你的FSC/SSC数值给我参考吗?? 可以试试看, 也可以交叉用liner/log, 只要能gate到你要的细胞, 这只是工具而已。 : 最後一个问题, : 我发现在不同刺激物刺激後, RAW 型态会变化, 这样适合作MTT test 吗? : 因为照相不能代表很客观的被活化, 我需要很客观的数量化来证明 : 落落长一串, 希望有人可以帮我....谢谢 这我就不太清楚, 不过既然有在上flow, 应该可以染一些代表活化的marker, 或者是测一些cytokine的量。 -- 我达达的马蹄是美丽的错误 我不是归人，我是马...... --

※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc) ◆ From: 203.70.125.229