作者allisa (小晴)
看板Biotech
标题Re: [讨论]想请问一下冷冻切片跟石蜡切片的比较~
时间Tue Oct 21 11:48:14 2008
※ 引述《ISME0907 (ISME)》之铭言:
: 因为之前不是做切片出身的..有几个问题想请教一下~
: 这两种切片法的比较
: 1.应用的广泛性
: 比如说是不是冷冻切片可以做很多染色实验(immunostain)..但是石蜡切片只可以做
: HE stain
冷冻跟石蜡都可以做免疫染色(萤光,DAB呈色) 也都可以做HE stain
不过像是皮肤还有一些软组织要做HE的话 用石蜡包埋比较能完整看到结构
: 2.sample的薄度差异
: 或许说..哪个灵敏度较高?
石蜡比较好切到很薄(6 um以下都很ok) 不过冷冻要切到6um比较难喔
: 3.保存性
: 何者可以保存较久?
石蜡的蜡块跟白片保存好的话放好几年都没问题 不过冷冻如果切完片了
不马上染 有时候很容易tissue会有霜就会有点破碎了
: 4.操作方便性
: 何者较快..比较无毒性之类的
冷冻比较快 不管是组织脱水包埋 到染色的步骤 冷冻切片都会比较快
: 印象中好像石蜡切片也可以做抗体抗原的染色实验..但会不会因为实验中加了甲醛
: 虽然染色前好像会先做一些处理..但是会不会影响染色实验压~..还是大家再做抗体
: 抗原染色..比较偏好冷冻切片的sample...
染萤光的会比较偏好用冷冻 其他还好唷 因为石蜡可以放很久 保存比较方便
随时要补都还可以再拿片子出来染
不过不知道其他人的习惯如何 好像也有人的观念跟你认为的差不多
: 还有一个问题喔..听说切片後的sample如果再去抽DNA或RNA..它的量都非常少..
: 我本来以为切片实验的过程中已加入的甲醛..不是已经破坏很多蛋白质了吗?
: 那DNA或RNA的量为何会减少压?
: 请教大家罗~
我觉得是因为切完片的sample如果要抽DNA RNA容易lost掉比较多 所以抽到的量才会很少
不过这是我的猜测
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◆ From: 140.116.60.138
1F:推 ISME0907:太感动了^^~ 10/21 15:32
2F:推 killua1214:有看有推~大感谢! 07/22 18:21
3F:推 truee:那请问一下冷冻切片有甚麽药剂可以增加保存时间呢?(大概一 07/20 16:38
4F:→ truee:月 4度保存就不太能用了) 07/20 16:38