作者: aimeiting (一个人的生活) 看板: Biotech
标题: [求救] reverse transcriptase
时间: Mon Oct 20 17:19:39 2008
最近刚开始学习实验
想请问板上的大家...
我要把cell lyse 取total RNA
用自己设计的GSP来做RT
之後PCR完要将整段insert进去vector
到时候要用RNAi去抑制表现
我RT要夹的是一个full lengh 的 gene 大概快900bp
老师希望我用有proofreading的enzyme来做
可是问题就在这....
reverse transcriptase 有具有proofreading的吗?
还是我要找的是有proofreading的 DNA polymerase?
还有想请问大家有比较推荐的厂商吗?我对厂商没什麽概念...
先谢谢大家了^^
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.116.63.31
1F：推 hek:1.没有 2.Thermostable DNA polymerase 2. Pfu/Stratagene 10/20 17:52
2F：推 hchs890843:我推Finnzymes的产品 10/20 18:30
3F：推 leftt:错字太多 10/20 21:47
4F：推 terp:Transcriptor High Fidelity cDNA Synthesis Kit (Roche) 10/20 23:29
5F：→ terp:(blend of a RTase & a proofreading mediating enzyme) 10/20 23:30
6F：→ terp:我们家有用过,效果还不错,但是很贵 10/20 23:32
※ 编辑: aimeiting 来自: 218.172.250.187 (10/20 23:58)
7F：→ aimeiting:没注意到拼字的正确..谢谢指正^^ 10/20 23:59
8F：推 leftt:你老板的意思应该是说PCR要用proofreading的作,以便可以夹出 10/22 16:35
9F：→ leftt:正确的full length fragment.但是900bp不算很长,一般说来稍 10/22 16:36
10F：→ leftt:好一点的taq就有这个能耐了.你作的物种是否为基因体序列定序 10/22 16:36
11F：→ leftt:已经做完的物种呢? 10/22 16:37