作者daphne316 ()
看板Biotech
标题Re: [求救] 抽DNA放overnight 与不放的作用差别
时间Tue Oct 14 23:50:06 2008
※ 引述《jingyi620 (平淡 超凡品味!)》之铭言:
: 这是前天抽DNA时学长问的一个很基本的问题~
: 起因是因为我第一次抽DNA时放37度overynight没有任何沉淀物 = = 学姐说应该要有
: 不过很奇妙的事做到最後加异丙醇时~有些许DNA沉淀 不过量非常少就是了
: 我使用的方式都是用CTAB萃取兰花的DNA~ (话说~学长说他的DNA很难抽 = = )
: 与上次不同的是~这次我放65度沉淀1小时....不过一开始也没看到什麽
: 是离心後才看到ㄧ咪咪的东西....
: 我才刚开始学习实验~(这也是我第二次抽DNA.......)
: 有很多步骤都是乖乖听着学长姐的话照做
: 也有跟学长姐讨论过为什麽没有沉淀的问题~
: 不过.....都没有确且的方法
: 我也知道要自己去思考每个步骤的意义 & 用途 ~
: 不过书上好像都没有解释步骤的原因~只有看到一堆的不同的potocol >"<
: 到底该怎麽训练自己独立思考的能力呢?
: 打到最後都不知道自己在说什麽~
: 感谢看完的人 ~
: 最後~再追加一个问题
: 抽DNA时要测几次O.D.值~学姐交我2次 一次是要回溶 一次是要跑电泳
: 学长说测要跑电泳的那一次就好了~ 还说我为什麽要乱改步骤 >"<
恩~~我也有疑问
因为我门实验室是抽完dna
就直接测浓度,如果不跑电泳才会冰起来
但是我不了解说
为什麽板上的各位都要说抽完後要冰起来
意思是说 隔天回溶後
再拿去离心会使DNA浓度提高吗?
因为我门实验室的学长姐都说 抽完DNA 如果浓度低的话
可拿去37度c作用 这样DNA溶解效率好 浓度才会提高
所以我现在不懂的是说
浓度提高适要冰起来还是要在37度作用呢?
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◆ From: 59.117.69.34
1F:推 sGoat:先想一下哪一步可增加沉淀量,温度对沉淀的效果,再回头看问题 10/15 01:18
2F:→ sGoat:还有DNA的化性,温度与溶解度的关系...(还有您所谓抽完是指괠 10/15 01:20
3F:推 yaliu:低温是帮助沈淀DNA...回溶的水或TE bf温度可提高 10/15 02:24
4F:→ tin0101:楼上正解 10/16 12:55