作者fish1234 ()
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标题[求救] p-ERK抑制
时间Wed Oct 8 00:19:16 2008
请问用MEK inhibitor U0126处理细胞抑制p-erk表现
处理前需要做serum starvation吗?
如果需要的话...serum starvation的时间要多长
我用的细胞是3T3-L1...U0126的浓度10,20,40uM
先做30分钟的前处理...之後再随着分化液加入细胞
在一小时跟四小时收细胞
抽细胞蛋白利用western blot分析
结果只有在40uM有看到抑制效果...但效果也没有很好
一般paper在10,20uM就可以看到抑制效果
但是我在10,20uM却完全没有抑制效果
找不出问题在哪
希望有做过这方面实验的人指点一下
感激不尽
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.129.62.201
1F:推 flyeagle1978:starvation能不用就不用 他不算正常condition 10/08 13:08
2F:→ flyeagle1978:U0126很强 你用的浓度也很高 如果真的不行 10/08 13:08
3F:→ flyeagle1978:你换PD98059试试 也许效果会比较好 10/08 13:09