小弟要做leukemia相关的研究.目前打算用HL-60 (Acute Myeloid Leukemic cell line) 跟 Molt-4(Acute Lymphoblastic Leukemic cell line)这两种人类的cell line建立 animal model. 理论上, 把SCID 或是NOD/SCID irradiate之後, 把细胞打到老鼠体内. 这些细胞会 跑到骨髓并生长,过了大约50~70天, 这些leukemic cell就会大量生长,跑到周边血液, 并造成老鼠发病及死亡. 为了要让後续的实验时间缩短,也让实验结果更稳定.我想要筛选出可以在老鼠体内容易 生长的subclone细胞. 实验设计上,就是把细胞打进去老鼠体内之後,观察老鼠的病徵.等到有病徵出来之後, 开始每隔一天抽静脉血,看看周边血液里Mononuclear lymphoid/myeloid cell 是不是 有增加, 并找出增加的peak, 在peak的时间点采全血, 分离出circulating的leukemic cell. 同学说,这种方法取得的leukemic cell数量可能很少.或许我可以直接把骨髓里 的细胞冲出来,取得比较多量的leukemic cell. 我想问的第一个问题,就是从周边血液里取leukemic cell,跟取骨髓里的leukemic cell, 这两种方式的可行性各为如何? 第二个问题,假设我解决了上述的问题,手上取得了一坨富含leukemic cell的 cell pool,我该怎麽分离human leukemic cell? 小弟身边没有cell sorting的资源,没办法用anti-human surface antigen的ab把 human leukemic cell分离出来.手上能用的,只有ficoll-paque.照其他paper的说法, 他们可以用ficoll-paque取得80%以上纯度的mononucleus leukemic cells. 但是我担心这样子筛出来的clone,养到最後纯度会掉很多. 希望版上的先进高手,能给些意见. 非常谢谢,感恩啦! --

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