作者MDPV (鸭小病毒)
看板Biotech
标题Re: 关於DNA polyacylamide
时间Sun Oct 5 01:30:33 2008
※ 引述《MDPV (鸭小病毒)》之铭言:
: ※ 引述《MDPV (鸭小病毒)》之铭言:
: : 各位前辈
: : 不知道有没有人有使用polyacylamide 跑DNA
: : 因为我的dna band很小
: : 所以要用此方法
: : 不过已经试了好多方法
: : 不知谁可以救我一下
: : 谢谢~~~~
: : 可以附上protoc吗
: sorry 我没有写清楚~~~
: 我DNA polyacylamide浓度如下:
: GEL% 20%
: 30% acylamide 8ml
: H2O 1.6ml
: 5x TBE 2.4ml
: 10%APS 200ul
: TEMED 10ul
: 以65V预跑30分钟後,loading sample後,以65V跑4.5小时
: 可是我出现的问题如下:
: 1.我制作出的胶孔洞中会有类似纤维状的东西 无法让我loading东西
: 2.看不出想要的band 连dna marker都看不见
: 3.请问各位前辈 我需要像跑SDS-PAGE有上下胶吗
: 4.如果我的dna只有83bp,我大概要跑到什麽位置?
: 因为对实验没接触过 所以烦请各位帮忙 谢谢
谢谢各位前辈给我的意见
我会在试试看
我现在已经用2%Agrose 0.5x TBE跑
可是还是看不到83bp的band
所以才想说用polyacylamide跑跑看 可是都不见成果
老师很急着要data 可是实验室有学长姊们会的
所以我上网查到的配方如上
所以 可以请前辈们慷慨给我其他可行的配方吗
谢谢~~~
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 218.173.227.222