作者borhen (希望梦想成真)
看板Biotech
标题[求救] 有关於SDS-PAGE transfer 的问题
时间Tue Sep 23 19:54:50 2008
有一个问题想向大家请教一下
我们实验室是利用半乾式转置槽做protein 转置到membrane
发现到一个很怪的现像
蛋白质sample为细胞total protein 所以理论上大到小都有
1. 我们把转置完的sds-page 拿去染色
发现到大分子量的蛋白质 大部分留在membrane上
但小分子量的protein都是乾乾净净的
甚至放在最下层的3M paper 有发现protein marker的存在
请问各位专家 实验到底发生什麽样的事情~@@
请大家给点建议~~谢谢
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.113.173.43
1F：推 aceliang:转渍？ 09/23 20:07
2F：推 aborwang:protein大小的差异，如果目标蛋白分子量大一点(>100kD) 09/23 20:12
3F：→ aborwang:我会延长transfer时间10%~20% 09/23 20:13
4F：推 tsubasawolfy:transfer太久小分子亮的protein会跑过membrane.. 09/23 20:42
5F：→ tsubasawolfy:不过还是要看你membrane材质(孔径) 09/23 20:42
6F：→ tsubasawolfy: 量- - 09/23 20:42