借标题顺便问 我之前是从细胞的染色体DNA当作模板做PCR 我使用Takara Ex Taq可以得到产物 但改用一只叫做"PfuTurbo"的polymerase就无法得到该片段 (我确定酵素没有坏掉,因为针对另一个DNA片段是可以得到产物的) 我後来是使用Takara的LA Taq(这只也有校正功能),就得到想要的产物 但是我还是不明白,为什麽换一只酵素,条件不变,就没有办法得到产物了 有高手可以解释一下吗? 谢谢! ※ 引述《aikawa7090 (小红)》之铭言： : 各位大大好，小弟最近在从cDNA做PCR，P出想要的gene，由於片段长度约 : 700Kb左右，且要的cDNA片段之後再transfect到细胞中看表现的，所以希 : 望能达到PCR出来的片段不要有任何错误^^ : 目前遇到的问题是，用taq能够PCR出想要的片段，但是同样的condition下， : 用Pfu就PCR不出来，老师建议我用taq做PCR，并加入一点pfu做proofreading， : 可是一加入pfu就PCR不出来了(连个band都没有= =) : 所以想请问大家，有没有大大手上有厂商的pfu tag mixture的protocol，也就 : 是PCR的sample成分要如何搭(pfu加多少，taq加多少，dNTP加多少等等) : 麻烦大家了，感恩~~ --

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