作者mimosasky (浪者天涯)
看板Biotech
标题Re: [求救] real time PCR方法
时间Sun Sep 21 17:18:16 2008
※ 引述《b750117 (猪皮)》之铭言:
: 各位前辈好
: 小妹今年刚入硕班
: 因为要作real time PCR
: 但 因为非本科系的
: 教授要我抓real time PCR的条件
: 请问 是要抓什麽条件阿
: 还有 教授有给我一个GADPH的primer
: 我只知道那是一个houskeepimg gene
: 那是有什麽功能??及在real time PCR中我应该怎麽用呢
: 又有什麽意义呢??
: 谢谢
觉得既然是非本科系的学生
应该先去了解real time PCR的原理
http://www.appliedbiosystems.com.tw/
上列网址为ABI中文原厂网站
右边可以看到有个中文线上科技讲座
里头会讲得很详细
新的primer来要先抓cDNA浓度
请以系列稀释抓取最适合的Ct值
Housekeeping gene: A gene involved in basic functions needed for the
sustenance of the cell. Housekeeping genes are constitutively expressed
(they are always turned ON).
它主要校正实验中的误差,
你的target gene会随着你的实验处理而表现量有所变化
但是以理想情况下它是不会的
请问实验室real time PCR是用哪个系统的?
仪器是哪一厂牌哪一机型的呢?
如果不知怎麽做...
其实也可以跟你所使用的reagent/仪器的代理或国内原厂联络
会有specialist帮你解决疑问的
以上浅见
若有任何错误请各位前辈不吝指正!
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