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标 题Re: [讨论] 抗体买来後的保存方式...
发信站清华生命科学 BBS (Sat Aug 16 04:16:46 2008)
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※ 引述《[email protected] (观察者)》之铭言:
> 先说enzyme好了,我用的DNA polymerase来就是摆-20度,量少大家也就没分装,每次
> 拿出来都直接取,不过看起来都还是液态,不晓得是否有加所谓的"抗冻剂"
对
通常是 glycerol
> 现在回到antibody上,而且是要冰-20度的那种。
> 我不晓得antibody是否像我用过的polymerase一样也可以保持液态,如果会凝固的话,
> 我想分装应该是绝对必要的手段,不过如果是可以保持液态的话,大家是否还会另外
> 分装呢?要如何知道有没有抗冻呢?
看 datasheet 上面会写这只抗体是溶在什麽东西里面
有 glycerol 的就是可以在 -20C 维持液态的
> 另外一个问题就是假设买来的antibody就有50ul,可是做一次western就只要1ul甚至
> 不到(因为稀释比在10000以上),请问这样要怎麽分装呢?
> 总不能拿50个PCR用的小eppendorf分装再塞得整盒都只有一种antibody吧?
分成十个 5uL 或者是 五个 10uL 冰在 -20C
用的时候拿一管出来 解冻 取用你需要的量
剩下来的放 4C
或者是 用的时候拿一管出来 解冻 整个泡成 working 的浓度
(用 BSA 或是 normal serium, 不要用牛奶, NaN3 自己斟酌) 用剩下的放 4C
抗体在 4C 只要不长东西 维持半年通常没问题
基本上根据个人经验与迷信
5% normal serium + 0.01% NaN3 的抗体 working solution = 4C 金刚不坏
或者是 用的时候拿一管出来 解冻 用买来专门溶一抗的 buffer 配好
用剩下的放 4C, 甚至有些 buffer 号称泡出来可以放室温几个月
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