: : 你指的很淡是切出来的产物对吧？ : 原因是 : 1.你的DNA已经先被稀释了5X 但这不是最主要的原因... : : 2.主要的原因是DNA的亮度取决於"片段长度跟量" （简单的说就是nucleotide的量） : 片段越短所要达到相同亮度 需要的数量就要更多 : 你的PCR product被RE切成更小的两个片段 当然两片段的亮度就会下降啦！ : : 如果想要让RE产物变亮一点就多提高加入的PCR product的量 : 如果怕RE切的不完全 可以拉长作用时间（1-2hr） : 前提是你用的酵素不会因时间太长而乱切XD : 嗯嗯~所以RE的量我就保持固定~只是再拉长时间罗?! 您刚说的每二十到三十分钟要做的事~我在TRY的时後 都有做了!!不过我就是那起来vortex一下下~再又小乌龟离一下下 不知这样会不会太剧烈? 刚有前辈提到始用KIT~但因为我们LAB真的没啥金费 所以我一直都很克难的在做实验~所以很多东西和方法 只能用现有或不再花钱要自己想办法了! : 再者 建议你做RE reaction时 每隔20-30min做一次spin down跟轻弹的动作 : 把蒸到盖子上的水气离心回溶液里 以维持正确的浓度 : : 还有一招就是... : 因为酵素会逐渐失活 : 所以在反应时间超过一半之後 再加一点点(0.2-0.5ul就够了)酵素进去 : 如果你用的酵素很贵的话...我不建议你这样做... : 但如果要这样做的话... : 那记得不要让你老板知道...XD : : : 以上 希望对你有帮助 祝实验顺利～ : : -- :

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