作者bolly (bolly)
看板Biotech
标题[讨论] 关於ligation buffer
时间Tue Aug 12 17:40:17 2008
小弟在作ligation实验时 使用过两倍跟十倍的ligation buffer
两倍buffer是pGEM-T附的 十倍buffer是P牌的ligase附的
通常我都会把新来的十倍buffer分装成2ul一管方便使用
分装全程置於冰上
两倍buffer分装成5ul一管 相同分装方式
但在作ligation时发现效力差很多 就算是4度over night也差不了多少
想请问大家是用两倍的还是十倍的buffer 市面上有在卖两倍buffer吗?
还是两倍buffer都是配合商品在卖的
或是说使用十倍buffer都会再另外加一些ATP
如果是外加ATP 那量会用多少?
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◆ From: 140.120.202.50
1F：推 elgase:2X 和10X应该都要work by两者都用过的路人. 08/12 22:32
2F：推 MrCAKE:用pGemT system时 10X buffer的效率本来就不如2X buffer 08/13 01:38
3F：→ MrCAKE:以前pGemT会附10X Buffer 但现在都只附2X Buffer 08/13 01:39
4F：→ MrCAKE:Promega原厂也是建议使用2X Buffer 10X要买ligase才会附 08/13 01:41
5F：→ bolly:我不只是pGEM-T 接其他的DNA也都还是2X buffer效力好 08/13 09:46