作者wangba (原来...)
看板Biotech
标题Re: [求救]IP抓不到target protien
时间Sat Jul 26 07:08:12 2008
※ 引述《bider (买沉木)》之铭言：
: 小弟这几天做IP
: 用monoclonal anti-mouse的1抗
: polyclonal anti-goat的2抗
: 结果western出来结果很多杂band
: 想请问有没有前辈有类似经验的可以解决@@
: 按理来说
: 不同的Fc应该不会有问题才对
: 是因为polyclonal造成的吗?
有一个方法可以试试看
先用pre-immune的serium把ㄧ些nonspecific的protein去掉
例如你的例子就是拿没有打过protein的老鼠的serium
加入beads之後离心完的上清液再加入你的monoclonal 1st antibody
如此就可以去除杂band
不过control要做好 (可以用另一个monoclonal ab)
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.129.9
1F：→ bider:我已经有用protienA/G mix去做preclean control 用mouse 07/26 07:10
2F：→ bider:IgG 还有一个postive control 07/26 07:12
3F：→ wangba:preclean除了beads之外还可以加入preimmune ab 07/26 07:13
4F：推 bider:我了解了 谢谢^^ 07/26 07:17