作者qoopig45 (黄金乌龙茶)
看板Biotech
标题Re: [求救] 请问要如何测定人工生产蛋白质之LPS含量
时间Fri Jul 25 00:21:31 2008
※ 引述《kitchhenlin (忘)》之铭言：
: 我们是用大肠杆菌作recombinant proteins
: 但现在想要去除里面的LPS 并在去除後测定LPS的含量
: 想请问有做过类似实验的大家推荐好用的去除LPS的方法及测定方式
: 谢谢！ ：）
之前也曾想过要去除重组蛋白的LPS，就我知道Pierce有在卖kit(polymyxin B)
不过那种Kit回收回来的蛋白我想应该所剩无几........
也有号称有高回收率的，不过问到的价钱真是太贵了
後来看这篇文献提到的方法
"Single step protocol to purify recombinant proteins with low endotoxin
contents"
Protein Expr Purif. 2006 Apr；46(2):483-8
感觉好像还不错，他们只是在wash时加入非离子界面活性剂便去掉了大部分内毒素!
同时有高的蛋白回收率~(缺点是可能要去冷房做纯化..)
有兴趣可以试试!
我本身是用chromogenic assay来定量内毒素~100多个test kit，15k左右~30分钟
就可以测出结果~应该是最快的
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