※ 引述《crement (cometoseeme)》之铭言： : 买0.22吧？！这个不太会穿过去。 : 除非有特殊理由，不然好像大家都用这种。 : 可以用那种mutlicolor protein marker。 : 用这个观察transfer的效果， 主要是没有现成的.22，反而.45有两大卷，所以实验室没打算买新的(NC也没用完) prestain marker我有想过，问题是只要颜色变淡很可能就看不到了，毕竟人眼 的灵敏度不太可能那麽高。 话说我偷懒只用CuCl2染.....感觉灵敏度还是不够。 : 顺便看看不同大小protein的效果。 : 因为不太会转穿过去，用semidry比较担心是转久了乾掉，membrane会『烧到』。 : 之前一般的gel我们用0.8mA/cm2，转两个小时， : 非常乾净，但是很久。 : 或是1mA/cm2，一小时也差不多， : 同事这个condition45分钟，一般大小也都可以过去。 我现在已改用three buffer system，.75cm gel都用↓ 0.5mA/cm2 5min(约6~10V) + 1.5mA/cm2 15~20min(最後约18V)， (有跑过2.5mA，gel也不会热，但转印槽有限制要25V以下，所以放弃) gel上的prestain marker确实看不到了，但我希望能更仔细确认，找到最佳条件 才好把整个流程教给实验室其他小组。 毕竟我们有同时跑40kD和250kD的，也有sample非常稀有的小组。 ※ 引述《vickwanlei (黑色礼堂)》之铭言： : 分子量大小是多少阿? : 分子量小的会把时间缩短 : 我试过用.45 PVDF叠两层 抓各时间点 : 转过头你就会看见下面那一张也会有 嗯....我是有点想和其他实验室要个一两张.22 PVDF啦，不过真的不方便的话， 就照你的方法.45叠两张吧。 -- 太初有道，道与耶和华同在，道就是耶和华。这道太初与耶和华同在。 万物乃藉祂所造，凡被造的没有一样不是藉着祂所造的。生命在祂里头， 这生命就是人的光。光照在黑暗里，黑暗却不接受光。 吾辈乃生於黑暗，行於黑暗。因神之指引，行向光明；又因撒旦诱惑，回归黑暗。 我不断地徘徊於光明与黑暗之间，从被造之日至今，又自今直到那审判之日的来临。 --

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