作者aDnEgVeIlL (观察者)
看板Biotech
标题[求救] SDS-PAGE的LANE会膨胀，把marker挤扁
时间Tue Jul 15 00:07:23 2008
http://www.ruf.rice.edu/~bioslabs/studies/sds-page/gelgoofs/bizarre.html#3
有点像右边那种，以marker来说，越下面就越瘦，简直像被排挤一样。
（不管放旁边或中间都一样）
当时老师检查我的配方，说我sample buffer的TRIS太浓(1X大概250mM)，
如果已经制好sample的话，则考虑把marker和loading buffer混合看能不能好一点，
不过我那批sample很快就用完了，也不想冒险乱动marker，这次重配lysis和loading
两种buffer，lysis只有10mM~30mM，3X loading buffer则是90mM和180mM。
我做排列组合去试，可是即使是最低的lysis(10mM)+3X loading(90mM)=36.6mM（1X）
sample lanes还是明显膨胀，虽然marker(62.5mM)没被挤那麽扁了，
还是没法像一般常见的data一样直，transfer後如果不染膜，也容易剪到别条lane。
既然marker的tris有62.5mM，为什麽还会被我的sample挤出去呢？
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太初有道，道与耶和华同在，道就是耶和华。这道太初与耶和华同在。
万物乃藉祂所造，凡被造的没有一样不是藉着祂所造的。生命在祂里头，
这生命就是人的光。光照在黑暗里，黑暗却不接受光。
吾辈乃生於黑暗，行於黑暗。因神之指引，行向光明；又因撒旦诱惑，回归黑暗。
我不断地徘徊於光明与黑暗之间，从被造之日至今，又自今直到那审判之日的来临。
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※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 123.192.40.98
1F：推 liuse:你把marker补你的1X sample buffer到跟其他sample一样体积 07/15 00:15
2F：→ liuse:情况会改善很多吧 07/15 00:15
3F：→ aDnEgVeIlL:请问marker和sample buffer混合不会有事吗？ 07/15 00:22
4F：→ aDnEgVeIlL:譬如说band的位置改变之类的（by SDS or 2-ME） 07/15 00:23
5F：推 zoom8080:有的marker也是要加sample buffer去煮才能load... 07/15 00:34
7F：推 qqo8855436:他们家的maker超好用 3ul就可以看到了 不用煮 07/15 21:49
8F：→ qqo8855436:我觉得是你胶没泡好耶?? 07/15 21:50
9F：→ qqo8855436:别人跑会这样吗?? 不然可能是电泳槽或电压不稳?? 07/15 21:51