作者tsubasawolfy (悠久の翼)
看板Biotech
标题Re: [求救] 关於有萤光蛋白结合的蛋白质表现
时间Sat Jul 5 07:22:38 2008
※ 引述《lstlst (lstlst)》之铭言:
: 话说我有一个A蛋白质
: 人家给我家老师的时候,已经BINDING上红色的CHERRY PROTEIN
: 当我接手这个PROJECT时
: 我把这个A-CHERRY CONSTRUCT TRANSFECT到细胞中表现蛋白质
: 之後跑胶,TRANSFER到膜上
: 用ANTI-A ANTIBODY 去STAIN
: 结果结果除了A-CHERRY CONSTRUCT 以外
: 底下又多跑出来两条很明显很深的BANDS
: 猜想可能是A PROTEIN SEQUENCE上其他的ATG干扰
: 所以我又突变了可能的4个地方的ATG..
: 但是用ANTI-A ANTIBODY OR ANTI-CHERRY ANTIBODY最後跑出来的结果
: 那两条深深的BAND还是阴魂不散...
: 我也问老师该如何是好,我们老师也不知道那两条BANDS该如何处理@@
: 因为这样就可能影响显微镜下萤光SIGNAL不纯,
: 请问有人可以帮帮我吗??
: 连要找资料都不知道要怎样打KEY WORDS @@
会不会是degradation form...??
要确认这个就。。。
不过要先用你们的antibody做IP...
跑完1D-SDS
->Comassive blue stain or SYBRO Ruby stain (别用silver stain)
->pick plot (没钱就自己拿tip插。。有钱就丢给学校或其他地方挖)
->1D gel digestion (同上)
->丢给中研院打MASS (一点才几百块 你两点加起来不会破千)
看这两个band到底是何方神圣後就比较好解决。。。
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SPHRYU ASUKA LANGLEY ◣ thePainter
Wenn "Liebe" heißt,dieses Versprechen bis zum Tode ▎◥ ◥ ◣
nicht zu brechen...dann verspreche ich: ◣ ▍ ▁▃▄▅▄▃◥
dich immer zu lieben,und keinen Mann außer dir, ◥◥ ▌ ▇
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solange ich lebe.Alles an mir...von Kopf bis Fuß, ◥▋ ▋"▅ ▁
sogar jedes Haar auf meinem Kopf gehört dir. ◥ ‵▆▆▇
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※ 编辑: tsubasawolfy 来自: 219.85.4.132 (07/05 07:26)
1F:推 lstlst:谢谢,我跟老师讨论看看 07/06 00:49