作者MrCAKE (Keep Working)
看板Biotech
标题Re: sonication做大片段的碎片
时间Mon Jun 30 20:07:26 2008
※ 引述《leondemon (狗狗)》之铭言:
: 目前我的genomic DNA要做sonication
: 但是跟一般ChIP不一样的是:DNA片段大小不同
: 我目前获得的genomic DNA主要的大片段有两种:3100Kb和282Kb
: 但是我希望它们碎片化的长度为:20~150Kb之间
: 於是似乎sonication就变得非常困难 因为要控制变成那麽长的片段似乎不容易
: 於是来问问看有没有什麽技巧 可以避免过度碎片化 并保持碎片的长度范围稳定?
: 另外要确定长度 是否一定就要使用pulse field Gel electrophoresis?
: sample准备或是进行过程有要注意的吗?
依据genomic DNA抽取方法的不同
一开始还没开始打断前的长度可能就不同
一般来说几十K到上百K都有可能吧
所以一开始你应该先确定刚抽取完的长度有多少
如果一开始就太碎 之後就甭谈了
如果不用sonication
我自己知道的办法大概就是做pippeting
你可以分别pippeting比如 100, 200, 300, 400, 500甚至更多次後
一起拿去跑胶来比较shearing後的大小
另外 要比较大小的话
就我所知应该就只有跑PFGE这个方法
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◆ From: 140.112.60.201
1F:推 leondemon:感谢 Q.Q 06/30 21:02