作者yabia1357 (yabia)
看板Biotech
标题[求救] 我的PCR跑不出东西~ 救命阿~~
时间Fri Jun 27 13:23:40 2008
我的问题和里面的一样,但是中的文章没有确切的解答出来...
所以只好跳出来向大家求救同样问题...
是这样的....
我在三个星期前,跑了一批PCR两次,都有我要的结果出来.
上星期,因为实验需要,我又再跑:同样sample,同样药剂,同样黏合温度,同
样primer....等,完全一样的条件,却跑出空空如也的照胶照片<=除了Marker
跑得真漂亮.... Q.Q
well,我以为我不小心手残,隔天比较小心地重做一次,同样空.
我开始检讨是不是因为primer或是sample坏掉,我有拿去做电泳看胶片,是OK的.
我也有考虑过的,啥ddH2O或是黏合时间的问题...这星期都把时间花在测
这个,不过都没跑出任何东西,只有Marker跑的很漂亮.... Q.Q
我开始在考虑是不是我的药剂的问题?? <=虽然我不觉得经过两个星期後就坏光
光了.(冰在-20度冰箱中都没碰)打算明天测试看看.
请问大家有没有啥意见可以帮忙给我参考一下?? 感激不尽!! 如果我测试成功,
答对的人我请吃饭!! Q.Q <=光弄个PCR都弄不出来,真的超丢脸的... >_<~
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◆ From: 140.122.152.241
1F：推 nixo:有换机器跑过吗？ 06/27 13:53
2F：推 sGoat:Taq是同一批吗?这些药剂只有你在使用吗?问一下吧... 06/27 15:55
3F：→ sGoat:实验室常发生的问题是别人的保存习惯不好,问一下吧... 06/27 15:56
4F：推 sGoat:真的要找的话,做个control吧,别忘了正统PCR是要做control的. 06/27 16:28
5F：→ yabia1357:有换机器,药剂除Taq,DMSO,其他都只我一个人在用. 06/27 17:56
6F：→ yabia1357:完全没做control,请问要拿啥来做control呢?有商品? @_@y 06/27 17:57
7F：推 seal0413:可能是taq enzyme...建议应该是要你做positive control 06/27 18:20
8F：推 davideason:实验室学弟妹超常问的问题:学长学长,怎麽没有band?? 06/27 18:52
9F：→ davideason:通常我都建议,就是在简单的实验也必须+control 06/27 18:54
10F：→ davideason:重点是,若干时间之後,原班人马又一定会问,学长学长 06/27 18:55
11F：→ davideason:怎麽没...话还没说完,我已经翻桌了 06/27 18:56
12F：推 jademan:下次记得拿到试剂就先分装,遇到没出来,旧的就全丢了.换新 06/27 19:34
13F：→ pupuwu:机器也换啦?同样 一台的再现性呢? 06/27 19:47
14F：推 YT:dNTP坏掉? dNTP也不能离冰太久~我这听说前辈有人dNTP坏掉所以P 06/28 16:08
15F：→ YT:不出来..加完後也最好先放冰上~当然primer也一样... 06/28 16:09
16F：推 qqo8855436:你的primer是哪一家的?? 之前有人跑出来过吗?? 06/28 17:24