作者ycmi (you can make it)
看板Biotech
标题Re: [求救] 想请问测posttranslational modificati …
时间Mon Jun 23 06:44:13 2008
※ 引述《puec2 (^^y)》之铭言：
: ※ 引述《ycmi (you can make it)》之铭言：
: : 想问欲利用wetern blot去测某protein的posttranslational modification，例：
: : phophorylation or acetylation...etc.时，在收lysate或处理sample时，不知有
: : 经验的前辈们对於这个步骤是否该注意些什麽事情？例如，要避免什麽动作或应该
: : 做什麽动作or加什麽lysis buffer等，才可以容易看到modification？或是才不会破
: : 坏我想要看的现象？谢谢！ :)
: acetylation我不清楚，如果是要看phosphorylation，lysis buffer里面要加
: protease inhibitor, phosphatase inhibitor 像是 sodium vanadate,
: PMSF, antipain.....等。当然准备的过程全程放冰上是需要的，不过煮完以後
: 就不要放冰上了，不然sds会沈淀。
那再请问各位大大...
若我已经用super lysis buffer了，是否还需再加inhibitor？
另外，若是stock在-20度C的话，会使phosphate掉吗？@@ 还是什麽因素，为何要存於
-80度C呢？或者说，一定要存於-80度C吗？
谢谢各位了 ~"~
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 140.112.206.179
1F：推 blence:你写super lysis buffer是没什麽人看得懂得 06/23 07:52
2F：推 HIbaby:^^ 06/23 08:20
3F：推 tsubasawolfy:看他的datasheet上面有没有写加inhibitor 06/23 11:39
4F：→ tsubasawolfy:-20.-80保存期限的差别吧? 06/23 11:40
5F：→ ycmi:super lysis buffer是指最强的lysis buffer 据说是所有蛋白质 06/23 19:58
6F：→ ycmi:皆失活，所以，常常不外加inhibitor，我才会如此提问... 06/23 19:59
7F：→ ycmi:所以，使用inhibitor，主要是因为怕phosphotase or protease? 06/23 20:01