作者oddball (天涯宦游人~)
看板Biotech
标题有关histone protein的蛋白质电泳
时间Sun Jun 22 10:57:15 2008
我抽取组蛋的的protocol是以下这个 (acid extraction)
http://www.abcam.com/ps/pdf/protocols/Histone%20extraction%20protocol.pdf
但是物种是阿拉伯芥(植物)
但最後去除上清液後是用8M urea回溶, 溶液会呈白色混浊状
在跑SDS-PAGE後染Commassie blue 不会看到很多条的Protein band
只有一条很明显的 大约55KD的band (loading protein:10ug )
以这样的蛋泳模式接着进行western blot, 1抗是H2B (大小约17左右)
会压到55KD的讯号 O_O 履试不爽
请问在我的做法中有什麽地方出错 或少做, 导致这样的结果吗?
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◆ From: 140.112.52.104
1F：推 blence:几个问题,1去除上清液?加acid後离心的上清液? 2urea回溶该 06/22 14:14
2F：→ blence:没有? 3western没有17k的H2B? 06/22 14:17
3F：→ blence:如果把上清液去除,那8M urea是要回溶pellet? 06/22 14:19
4F：→ oddball:加acid後, 离心的上清液去除, pellet以8M urea回溶 06/22 14:19