作者threestars (等待)
看板Biotech
标题Re: [求救] touchdown pcr
时间Sat Jun 21 19:35:13 2008
※ 引述《threestars (等待)》之铭言:
: ※ 引述《bbiioo (梅子)》之铭言:
: : 想请问这个pcr
: : 是什麽情况下可以使用
: : 是 想要增加产物产量吗?
: : 因为现在在进行的pcr
: : 还在试他的最佳的Tm
: : 老师是建议跑gradient
: : 我是想说利用这个方法找
: : 不知道可不可以
: : 我是要从chromosome DNA 找出目标基因来
: : 如果说用TOUCHDOWN这个方法
: : 是每一个cycle降0.5度吧?
: : 那范围怎麽设呢??
: primer 黏合温度一开始比Tm值 高15~18度 每cycle降1度
: 直到温度到比Tm值低五到六度
因为黏合温度有时不好找! 如果只要求有想要的东西
应该不是什麽增加专一性的方法
不过可以减少花费时间试 条件的时间
可以参考
Touchdown PCR to circumvent spurious priming during gene amplification.
Nucleic Acid Res.(1991) 19: 4008
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如果活在世上只是扮演着大家所期望的自己
那扮演好了又怎样
不如静静的让自己消失吧
总是多余的存在只是种荒谬的错误
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◆ From: 61.223.228.60
1F:推 bbiioo:恩~~谢谢你 06/22 23:06