作者puec2 (^^y)
看板Biotech
标题Re: [求救] 想请问测posttranslational modificati …
时间Fri Jun 20 13:49:32 2008
※ 引述《ycmi (you can make it)》之铭言：
: 想问欲利用wetern blot去测某protein的posttranslational modification，例：
: phophorylation or acetylation...etc.时，在收lysate或处理sample时，不知有
: 经验的前辈们对於这个步骤是否该注意些什麽事情？例如，要避免什麽动作或应该
: 做什麽动作or加什麽lysis buffer等，才可以容易看到modification？或是才不会破
: 坏我想要看的现象？谢谢！ :)
acetylation我不清楚，如果是要看phosphorylation，lysis buffer里面要加
protease inhibitor, phosphatase inhibitor 像是 sodium vanadate,
PMSF, antipain.....等。当然准备的过程全程放冰上是需要的，不过煮完以後
就不要放冰上了，不然sds会沈淀。
--
※ 发信站: 批踢踢实业坊(ptt.cc)
◆ From: 61.56.130.95
1F：推 blence:拼错了,是phosphatase, 常有的PPaseI有NaF, Na3VO4, b-gly 06/20 14:12
2F：→ blence:或上网找PPase inhibitor cocktail,许多公司有,但是比较贵 06/20 14:14
3F：→ blence:acetylation可用Sodium Butyrate(NaB)或TSA等,前者常用便宜 06/20 14:16
4F：推 liuse:当天准备完当天跑 要冰要冰-80 06/20 14:18
※ 编辑: puec2 来自: 61.56.130.95 (06/20 18:47)
5F：推 ycmi:如果已经用super lysis buffer收，还需要inhibitor吗？Thx!:) 06/20 22:24