作者differkb (失落)
看板Biotech
标题[求救] 如何精准的定量inclusion body中的蛋白质量？
时间Tue Jun 17 21:43:55 2008
如题 小弟我最近需要精准的测定测定inclusion body的蛋白质浓度
之前试过先用超音波震荡的方式 来resuspend蛋白 但是 同一样品 不同时间
测出来的蛋白质 经过调整之後 跑SDSPAGE依旧看起来有明显量的不同
所以 采用lowry的方式 但事在稀释液中直接一般加入带有0.1%SDS的buffer
可是我发现inclusion body确实完全被溶解了 但 後来 BSA测定的标准品 750数值
异常的低 250ug/mL 只有0.024？ 不太可能吧！ 後续是200ug/mL 0.002
100ug/mL -0.022 50ug/mL -.0086 25ug/mL -0.074
.....
BSA是刚从-80度C 取出後的样品 应该不太可能有问题 而且我拿了两管都有类似的问题！
不知道有没有人测过inclusion body的蛋白质含量 请问要如何测才会准确呢？
谢谢
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